scholarly journals Efecto antioxidante del extracto hidroalcohólico de Calceolaria engleriana Kraenzl “wawillay” in vivo en ratones con lesión hepática

2019 ◽  
Vol 3 (3) ◽  
pp. 118
Author(s):  
Farah Mendoza-Romero ◽  
Jorge Arroyo-Acevedo
Keyword(s):  
Peroxidación Lipídica

Objetivos. Evaluar el efecto antioxidante del extracto hidroalcohólico de Calceolaria engleriana Kraenzl“wawillay” in vivo mediante el uso de ratones con lesión hepática inducida por tetracloruro de carbono(CCL4). Materiales y métodos. Estudio experimental. Se utilizó cuatro grupos de seis ratones albinos Musmusculus - cepa Balb/c/CNPB: un grupo blanco, un grupo control que recibió vitamina E (Vitesol® E 400U.I) y dos grupos a los que se les administró extracto hidroalcohólico de Calceolaria engleriana Kraenzl“wawillay” en dosis de 50 y 300 mg/kg. Para la evaluación del efecto antioxidante in vivo se sometió a losratones a un modelo experimental de hepatotoxicidad por tetracloruro de carbono (CCL4) antes y durantelas intervenciones. Mediante la reacción del ácido tiobarbitúrico se cuantificó el malonaldialdehido (MDA)formado y se calculó el porcentaje de inhibición de peroxidación lipídica (POL) con el que se establecierondiferencias por grupos. Resultados. El tamizaje fitoquímico mostro la presencia muy abundante deflavonoides. Los porcentajes de inhibición de la POL obtenidos fueron de un 22 y 45%, para las dosisde 50 y 300 mg/kg del extracto hidroalcohólico. Si bien se encontraron diferencias significativas en lacomparación entre grupos (p>0,05), las intervenciones experimentales no superaron los resultadosdel grupo control con vitamina E (60%). Conclusiones. En las condiciones experimentales, el extractohidroalcohólico de Calceolaria engleriana Kraenz “wawillay” a dosis de 50 y 300 mg/kg presenta actividadantioxidante, siendo esta aun menor a la mostrada por el estándar (vitamina E).

scholarly journals Hipertrofia cardíaca patológica: efectos del silenciamiento miocárdico in vivo del intercambiador Na+/H+ (NHE-1)

2019 ◽  
Author(s):  
◽  
Andrés J. Medina
Keyword(s):  
Estrés Oxidativo ◽  
Insuficiencia Cardiaca ◽  
Peroxidación Lipídica

Frente a situaciones de sobrecarga hemodinámica (de presión o de volumen) el corazón responde aumentando su masa fundamentalmente a expensas del crecimiento de los miocitos, condición conocida como hipertrofia cardíaca (HC). Sin embargo, el corazón está compuesto varios tipos celulares tales como cardiomiocitos, fibroblastos, células endoteliales, células de musculo liso vascular y una matriz extracelular. Si bien los cardiomiocitos constituyen sólo un tercio del número total de células, representan entre el 70-80 % de la masa cardíaca y el crecimiento postnatal del corazón ocurre principalmente por el aumento del tamaño de estas células musculares estriadas. La HC puede ser una adaptación favorable frente a un aumento del trabajo cardíaco (HC fisiológica), como ocurre en individuos sanos que realizan rutinas de entrenamiento físico isotónico o durante el embarazo. Por el contrario, puede representar la antesala de la insuficiencia cardíaca (HC patológica) cuando es desencadenada en el marco de enfermedades cardiovasculares tales como la hipertensión arterial, algunas valvulopatías o el post infarto agudo de miocardio. Más aun, la HC patológica es uno de los principales factores independientes de riesgo cardiovascular asociado habitualmente al desarrollo de arritmias, insuficiencia cardíaca y muerte. En este sentido, es importante recordar que las enfermedades cardiovasculares representan la principal causa de mortalidad en los países desarrollados, siendo en la República Argentina, según datos del Ministerio de Salud, responsables de alrededor de 100 mil muertes por año. Por lo tanto, resulta imprescindible el desarrollo de mejores estrategias terapéuticas. La activación crónica del sistema renina-angiotensina- aldosterona favorece el desarrollo de varias enfermedades cardiacas en las que la HC patológica ocupa un lugar preponderante. En este contexto, la hiperactividad de la isoforma 1 del intercambiador Na+/H+ (NHE-1) juega un rol clave. El objetivo del siguiente trabajo de Tesis Doctoral fue prevenir el desarrollo de HC patológica inducida infusión crónica por angiotensina II (ANGII) mediante el silenciamiento génico del NHE-1 en el miocardio. La inyección intramiocárdica de un lentivirus portador de una secuencia de ARN de interferencia (ARNi) contra el NHE-1 (lshNHE1) redujo significativamente la expresión del NHE-1 exclusivamente en corazón.(~ 48 %) y previno el remodelado cardiaco en ratas Wistar expuestas a ANGII (peso biventricular/longitud de la tibia: 24,03 ± 0,7915 mg/mm vs. 28,45 ± 0,9779 mg/mm y % de colágeno 2,526 ± 0,5003 vs. 5,982 ± 1,043; l-shNHE1 + ANGII vs ANGII, respectivamente). Interesantemente, estos resultados se acompañaron de una mejora en la función cardíaca evaluada mediante ecocardiografía, a pesar de no generase cambios en la presión arterial sistémica que permaneció elevada en el grupo inyectado con lshNHE1 (Δ Fracción de acortamiento 0,5960 ± 0,4228 vs. -0,9567± 0,06888 y presión arterial al final del tratamiento con ANGII 141,2 ± 6,117 mm Hg vs. 134,1 ± 6,723 mm Hg; l-shNHE1 + ANGII vs ANGII, respectivamente). Por otra parte, la infusión de ANGII produjo un aumento significativo en la actividad de la enzima NADPH oxidasa, sin ser evitado por la inyección del l-shNHE1; aunque sí evitó el aumento del estrés oxidativo revelado por la normalización de la peroxidación lipídica medida por la técnica de T-BARS (12,40 ± 2,887 vs. 23,05 ± 1,537; l-shNHE1 + ANGII vs. ANGII, respectivamente). Estos resultados permiten especular sobre la posibilidad de que la inyección intramiocárdica de un lentivirus portador de una secuencia de ARNi contra el NHE-1 pueda convertirse en un futuro no tan lejano, en una herramienta para la prevención de la HC patológica inducida por ANGII. Antes, será necesario evaluar y resolver aspectos de índole ética, sobre la posibilidad de efectos cancerígenos por la inserción en sitios no deseados del genoma viral, la duración del silenciamiento o necesidad de reiteración de la administración, entre los más importantes.

scholarly journals Evaluación de potenciales propiedades antiaterogénicas y antitumorales del aceite de la cáscara de Citrus reticulata

2019 ◽  
Author(s):  
◽  
María Agustina Castro
Keyword(s):  
Western Blot ◽  
Raw 264.7 ◽  
Citrus Reticulata ◽  
Estrés Oxidativo ◽  
Citrus Reticulata Blanco ◽  
Ciclo Celular ◽  
Los Grupos ◽  
Peroxidación Lipídica

En nuestro laboratorio se demostró en líneas celulares tumorales, que monoterpenos como geraniol, cineole, limoneno y linalool poseen propiedades hipocolesterogénicas y antiproliferativas y que éstas a su vez son potenciadas de manera sinérgica al combinar los compuestos individuales (Kladniew et al. 2014; Manassero et al. 2013; M P Polo, Crespo, and De Bravo 2011). Por otro lado, existen numerosos reportes bibliográficos acerca del efecto antioxidante que poseen distintos aceites esenciales y/o sus componentes individuales. A partir de estos resultados se planteó que el aceite de la cáscara de mandarina (ACM) Citrus reticulata Blanco variedad Dancy, que posee una mezcla de varios isoprenoides, presenta un gran potencial en el tratamiento de hipercolesterolemias, prevención de ateroesclerosis y enfermedades tumorales. Para ello nos propusimos estudiar la capacidad de este aceite de modular vías metabólicas lipídicas asociadas al desarrollo de estas patologías. Se evaluaron los mecanismos bioquímicos y moleculares que desencadena el ACM a fin de aportar conocimiento sobre su potencial utilidad terapéutica en reemplazo o complemento de terapias existentes en el tratamiento de hipercolesterolemias, prevención de enfermedades cardiovasculares y como quimiopreventivos y/o quimioterapéuticos. Se determinó la composición lipídica del ACM empleando técnicas cromatográficas y espectofotométricas. Se evaluó el potencial antiaterogénico estudiando los efectos y mecanismos del aceite sobre la síntesis de lípidos, en particular sobre la vía del mevalonato (VM) empleando precursores radiactivos en un modelo de célula hepática humana (HepG2). Se estudiaron los efectos del aceite sobre el depósito de lípidos de reserva citoplasmática en células espumosas obtenidas por diferenciación de macrófagos (RAW 264.7) incubados con lipoproteínas de baja densidad (LDL) oxidadas; así como el efecto en los niveles de expresión de enzimas responsables de la síntesis y degradación de los mismos. Además se analizó el efecto antioxidante del aceite sobre las LDL involucradas en el proceso de formación de placas ateroscleróticas. Para evaluar el potencial antitumoral del ACM se estudiaron los efectos y mecanismos de acción del aceite sobre la viabilidad, proliferación y muerte celular en un modelo de célula tumoral humana (A549) realizando ensayos bioquímicos-moleculares en células en cultivo (ensayos in vitro) e implantadas en ratones atímicos (ensayos in vivo). Se analizó además el efecto del aceite sobre el estado redox celular evaluando los niveles de peroxidación lipídica y la actividad de enzimas del sistema antioxidante en células A549. El ACM contiene compuestos volátiles y no volátiles. Más del 90% de la fracción volátil corresponde al limoneno (Li) y el resto a distintos compuestos isoprenoides. En la fracción no volátil se encuentran: triacilglicéridos y carotenoides (libres y esterificados). Los efectos de bajas concentraciones del aceite que no disminuyen la viabilidad celular (<60 μL/L) sobre el metabolismo lipídico en hepatocitos mostraron una inhibición de la síntesis de colesterol con un aumento la incorporación de acetato en los intermediarios de la VM, escualeno y lanosterol. En cambio altas concentraciones del ACM (≥60 μL/L), disminuyen en hepatocitos no sólo la síntesis de colesterol, sino también la incorporación de acetato en todos los intermediarios de la VM evaluados. En células espumosas se observó una disminución del contenido de lípidos neutros. La disminución de los niveles de expresión de GPAT3 observada estaría contribuyendo a la reducción del contenido lipídico en estas células. El ACM posee mayor efecto inhibitorio sobre la viabilidad celular de las líneas tumorales estudiadas que su componente mayoritario el Li, lo que sugiere que la combinación de los distintos compuestos presentes en el ACM, generaría un efecto sinérgico o aditivo sobre la inhibición de la viabilidad celular de HepG2 y A549. El aceite bloquea la progresión del ciclo celular de las células A549 (línea tumorigénica). Las concentraciones evaluadas del ACM causaron un aumento en la población de células en fase G2/M con una simultánea disminución de células en fase S y las células tratadas con las concentraciones más altas del ACM (IC50) mostraron cambios significativos en todas las etapas del ciclo, promoviendo un arresto más pronunciado en la fase G0/G1 con disminución de los niveles de ciclina E, aumento de los de ciclina B1 en ambas concentraciones estudiadas y sin diferencias significativas en la expresión de ciclina D1. Además, la cuantificación de las imágenes obtenidas en células A549 por microscopía de fluorescencia demostró que tanto bajas (IC25) como altas concentraciones (IC50) del ACM ocasionaron un incremento significativo del porcentaje de células TUNEL positivo, evidenciando un efecto pro-apoptótico del aceite. Los ensayos in vivo demostraron una reducción significativa en el crecimiento tumoral cuando se le administró a los animales una dosis de 5.25 mg ACM/ratón/día en el alimento. El ACM incrementó la apoptosis en células tumorales in vivo. No se observaron cambios significativos en la ingesta de alimento, peso corporal, peso e histología de órganos ni en parámetros bioquímicos séricos de toxicidad hepática en ratones tratados con el ACM. El análisis por Western blot mostró que los niveles de Ras unida a membrana disminuyeron significativamente en los tumores de ratones tratados con 5.25 mg ACM/ratón/día, con respecto a los tumores control. Esta proteína anclada a la membrana desempeña un papel central en la promoción de la proliferación celular. Sin embargo, los niveles totales de Ras no variaron significativamente en ninguno de los grupos experimentales. Se observó una tendencia al aumento en los niveles de peroxidación lipídica en tumor, así como una disminución de los mismos en hígado. Por último el ACM disminuyó los niveles de peroxidación lipídica en LDL humanas y en células en cultivo incubadas con un agente inductor de estrés oxidativo e incrementó en las células en cultivo, en un estado redox fisiológico, la actividad de enzimas fundamentales del sistema antioxidante celular como son catalasa (CAT), superóxido dismutasa (SOD) y glutatión-S-transferasa (GST). Los resultados obtenidos a lo largo de este trabajo demuestran que el ACM, a través de múltiples mecanismos, ejerce un efecto antiproliferativo y antilipogénico que permite sugerir su utilidad terapéutica en reemplazo o complemento de terapias existentes en el tratamiento de hipercolesterolemias, prevención de enfermedades cardiovasculares y como quimiopreventivo y/o quimioterapéutico.

Fine Structural Changes in the Microvasculature of the Mouse Pinna: Aging and Radiation Injury

1974 ◽  
Vol 32 ◽  
pp. 54-55
Author(s):  
S. Phyllis Steamer ◽  
Rosemarie L. Devine
Keyword(s):  
Structural Changes ◽  
Radiation Treatment ◽  
Arterial Stenosis ◽  
Ultrastructural Changes ◽  
Vascular Effects ◽  
Microvascular Changes ◽  
Surrounding Connective Tissue ◽  
Fission Neutrons ◽  
Total Body

The importance of radiation damage to the skin and its vasculature was recognized by the early radiologists. In more recent studies, vascular effects were shown to involve the endothelium as well as the surrounding connective tissue. Microvascular changes in the mouse pinna were studied in vivo and recorded photographically over a period of 12-18 months. Radiation treatment at 110 days of age was total body exposure to either 240 rad fission neutrons or 855 rad 60Co gamma rays. After in vivo observations in control and irradiated mice, animals were sacrificed for examination of changes in vascular fine structure. Vessels were selected from regions of specific interest that had been identified on photomicrographs. Prominent ultrastructural changes can be attributed to aging as well as to radiation treatment. Of principal concern were determinations of ultrastructural changes associated with venous dilatations, segmental arterial stenosis and tortuosities of both veins and arteries, effects that had been identified on the basis of light microscopic observations. Tortuosities and irregularly dilated vein segments were related to both aging and radiation changes but arterial stenosis was observed only in irradiated animals.

Induction and Differentiation of Dental Epithelium in Vivo and in Vitro

1982 ◽  
Vol 40 ◽  
pp. 142-145
Author(s):  
E. J. Kollar
Keyword(s):  
Connective Tissue ◽  
Oral Mucosa ◽  
Basal Lamina ◽  
Functional Derivatives ◽  
Specific Source ◽  
Dental Epithelium ◽  
Connective Tissue Stroma

The differentiation and maintenance of many specialized epithelial structures are dependent on the underlying connective tissue stroma and on an intact basal lamina. These requirements are especially stringent in the development and maintenance of the skin and oral mucosa. The keratinization patterns of thin or thick cornified layers as well as the appearance of specialized functional derivatives such as hair and teeth can be correlated with the specific source of stroma which supports these differentiated expressions.

Ultrastructural Correlations between Clonal Human Tumor Colonies and in Vivo Neoplasms

1982 ◽  
Vol 40 ◽  
pp. 210-211
Author(s):  
M.J. Murphy ◽  
R.R. Price ◽  
J.C. Sloman
Keyword(s):  
Cultured Cells ◽  
Human Tumor ◽  
Cell Type ◽  
Tumor Mass ◽  
Initial Cell ◽  
Cloning Assay ◽  
Human Tumor Cloning ◽  
The Relationship

The in vitro human tumor cloning assay originally described by Salmon and Hamburger has been applied recently to the investigation of differential anti-tumor drug sensitivities over a broad range of human neoplasms. A major problem in the acceptance of this technique has been the question of the relationship between the cultured cells and the original patient tumor, i.e., whether the colonies that develop derive from the neoplasm or from some other cell type within the initial cell population. A study of the ultrastructural morphology of the cultured cells vs. patient tumor has therefore been undertaken to resolve this question. Direct correlation was assured by division of a common tumor mass at surgical resection, one biopsy being fixed for TEM studies, the second being rapidly transported to the laboratory for culture.

Structural analysis of the photosynthetic membrane from Ectothiorhodospira halochloris

1983 ◽  
Vol 41 ◽  
pp. 740-741
Author(s):  
H. Engelhardt ◽  
R. Guckenberger ◽  
W. Baumeister
Keyword(s):  
Lattice Structure ◽  
Bacterial Species ◽  
Hexagonal Lattice ◽  
Reaction Centre ◽  
Photosynthetic Membrane ◽  
Rhodopseudomonas Viridis ◽  
Photosynthetic Membranes ◽  
Ectothiorhodospira Halochloris ◽  
Main Components

Bacterial photosynthetic membranes contain, apart from lipids and electron transport components, reaction centre (RC) and light harvesting (LH) polypeptides as the main components. The RC-LH complexes in Rhodopseudomonas viridis membranes are known since quite seme time to form a hexagonal lattice structure in vivo; hence this membrane attracted the particular attention of electron microscopists. Contrary to previous claims in the literature we found, however, that 2-D periodically organized photosynthetic membranes are not a unique feature of Rhodopseudomonas viridis. At least five bacterial species, all bacteriophyll b - containing, possess membranes with the RC-LH complexes regularly arrayed. All these membranes appear to have a similar lattice structure and fine-morphology. The lattice spacings of the Ectothiorhodospira haloohloris, Ectothiorhodospira abdelmalekii and Rhodopseudomonas viridis membranes are close to 13 nm, those of Thiocapsa pfennigii and Rhodopseudomonas sulfoviridis are slightly smaller (∼12.5 nm).

The Infection of Cells by Bullet-Shaped Viruses

1969 ◽  
Vol 27 ◽  
pp. 372-373
Author(s):  
Frederick A. Murphy ◽  
Alyne K. Harrison ◽  
Sylvia G. Whitfield
Keyword(s):  
Electron Microscopy ◽  
Physical Properties ◽  
Host Cell ◽  
Thin Section ◽  
Cultured Cells ◽  
Cell Infection ◽  
Thin Section Electron Microscopy ◽  
Section Electron ◽  
Section Electron Microscopy

The bullet-shaped viruses are currently classified together on the basis of similarities in virion morphology and physical properties. Biologically and ecologically the member viruses are extremely diverse. In searching for further bases for making comparisons of these agents, the nature of host cell infection, both in vivo and in cultured cells, has been explored by thin-section electron microscopy.

Ultrastructure of melanocyte-keratinocyte interactions and pigment transfer in vitro

1978 ◽  
Vol 36 (2) ◽  
pp. 650-651
Author(s):  
Raul I. Garcia ◽  
Evelyn A. Flynn ◽  
George Szabo
Keyword(s):  
Direct Injection ◽  
Skin Pigmentation ◽  
Freeze Fracture ◽  
Pigment Granule ◽  
Time Lapse ◽  
Ultrastructural Level ◽  
Lanthanum Tracer ◽  
A Cell

Skin pigmentation in mammals involves the interaction of epidermal melanocytes and keratinocytes in the structural and functional unit known as the Epidermal Melanin Unit. Melanocytes(M) synthesize melanin within specialized membrane-bound organelles, the melanosome or pigment granule. These are subsequently transferred by way of M dendrites to keratinocytes(K) by a mechanism still to be clearly defined. Three different, though not necessarily mutually exclusive, mechanisms of melanosome transfer have been proposed: cytophagocytosis by K of M dendrite tips containing melanosomes, direct injection of melanosomes into the K cytoplasm through a cell-to-cell pore or communicating channel formed by localized fusion of M and K cell membranes, release of melanosomes into the extracellular space(ECS) by exocytosis followed by K uptake using conventional phagocytosis. Variability in methods of transfer has been noted both in vivo and in vitro and there is evidence in support of each transfer mechanism. We Have previously studied M-K interactions in vitro using time-lapse cinemicrography and in vivo at the ultrastructural level using lanthanum tracer and freeze-fracture.

Effect of Some Metabolic Inhibitors on Vinblastine-Induced Ribosomal-Granular Material Complexes

1971 ◽  
Vol 29 ◽  
pp. 548-549
Author(s):  
Awtar Krishan ◽  
Dora Hsu
Keyword(s):  
Granular Material ◽  
Rna Synthesis ◽  
Culture Medium ◽  
Actinomycin D ◽  
Metabolic Inhibitors ◽  
Protein And Rna Synthesis ◽  
Apparent Reduction ◽  
Plant Alkaloids ◽  
In Cells

Cells exposed to antitumor plant alkaloids, vinblastine and vincristine sulfate have large proteinacious crystals and complexes of ribosomes, helical polyribosomes and electron-dense granular material (ribosomal complexes) in their cytoplasm, Binding of H3-colchicine by the in vivo crystals shows that they contain microtubular proteins. Association of ribosomal complexes with the crystals suggests that these structures may be interrelated.In the present study cultured human leukemic lymphoblasts (CCRF-CEM), were incubated with protein and RNA-synthesis inhibitors, p. fluorophenylalanine, puromycin, cycloheximide or actinomycin-D before the addition of crystal-inducing doses of vinblastine to the culture medium. None of these compounds could completely prevent the formation of the ribosomal complexes or the crystals. However, in cells pre-incubated with puromycin, cycloheximide, or actinomycin-D, a reduction in the number and size of the ribosomal complexes was seen. Large helical polyribosomes were absent in the ribosomal complexes of cells treated with puromycin, while in cells exposed to cycloheximide, there was an apparent reduction in the number of ribosomes associated with the ribosomal complexes (Fig. 2).

In vitro and in vivo polysaccharides assembly: ultrastructural and cytochemical study of growing plant cell wall components.

1978 ◽  
Vol 36 (2) ◽  
pp. 434-435
Author(s):  
D. Reis ◽  
B. Vian ◽  
J. C. Roland
Keyword(s):  
Cell Wall ◽  
Self Assembly ◽  
Plant Cell Wall ◽  
Higher Plants ◽  
Three Dimensional ◽  
Cytochemical Study ◽  
Wall Components

Wall morphogenesis in higher plants is a problem still open to controversy. Until now the possibility of a transmembrane control and the involvement of microtubules were mostly envisaged. Self-assembly processes have been observed in the case of walls of Chlamydomonas and bacteria. Spontaneous gelling interactions between xanthan and galactomannan from Ceratonia have been analyzed very recently. The present work provides indications that some processes of spontaneous aggregation could occur in higher plants during the formation and expansion of cell wall.Observations were performed on hypocotyl of mung bean (Phaseolus aureus) for which growth characteristics and wall composition have been previously defined.In situ, the walls of actively growing cells (primary walls) show an ordered three-dimensional organization (fig. 1). The wall is typically polylamellate with multifibrillar layers alternately transverse and longitudinal. Between these layers intermediate strata exist in which the orientation of microfibrils progressively rotates. Thus a progressive change in the morphogenetic activity occurs.

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